Le temps et le coût liés à la mesure de la charge microbienne dans les eaux à usage pharmaceutique sont importants. De plus, l'échantillonnage manuel d'un circuit d'alimentation d'eau et les points d'utilisation sont sujets à la contamination, ce qui peut entraîner un pourcentage élevé de mauvais résultats. Chaque faux positif doit faire l'objet d'une enquête complète, ce qui représente un coût élevé.
L'industrie
pharmaceutique a besoin d'une autre solution.
La
fluorescence induite par laser (LIF) est une technique de mesure optique
consistant à exciter une molécule pour atteindre un niveau d'énergie supérieur
par l'absorption de photons provenant d'une source d'excitation. Après une
fraction de seconde, la molécule libère les photons, ce qui provoque une
émission de lumière à une longueur d'onde supérieure à celle de la longueur
d'onde d'excitation. La lumière émise qui est détectée et mesurée.
Tous
les micro-organismes sont composés de métabolites (NADH ou riboflavine par
exemple), chargés de réguler leur croissance et leur développement. Ces
composés deviennent fluorescents lorsqu'ils sont exposés à de la lumière d'une
longueur d'onde précise.
Très
sensible, la technique LIF permet de déceler des microbes et est utilisée
depuis un certain nombre d'années déjà en sciences de la vie dans le cadre de
la microscopie en fluorescence, de la cytométrie en flux et d'autres
technologies.
Le
système 7000RMS de Mettler Toledo Thornton est un analyseur de détection
microbienne en ligne dédié à la détermination en continu et en temps réel de la
charge microbienne dans les eaux à usage pharmaceutique. Ce système utilise la
LIF afin de mesurer directement la contamination microbienne sans qu'une
période d'incubation ne soit nécessaire. Aucun réactif ni colorant n'est
requis.
Pour
l'installation de l'analyseur 7000RMS en ligne, un flux d'échantillons issus de
la réserve d'eau doit être relié à la vanne d'arrivée de l'analyseur. L'eau
passe par une zone de mesure, où elle est excitée par un laser, ce qui provoque
la fluorescence des métabolites présents dans les bactéries. Parallèlement, la
diffusion de Mie permet de déterminer la taille des particules éventuellement
présentes dans l'échantillon. Chacun de ces phénomènes est identifié par
différents détecteurs et les données sont ensuite traitées dans l'analyseur à
l'aide d'algorithmes sophistiqués exclusifs. Pour déterminer la présence de
microbes, le signal de fluorescence et la mesure de la taille des particules
doivent avoir lieu simultanément et répondre à certains critères.
Le
nombre de microbes dans l'échantillon s'affiche sur l'interface de l'écran
tactile de l'unité dans les Unités auto-fluorescentes et est actualisé toutes
les deux secondes. Trois alarmes sont disponibles en cas de franchissement des
seuils d'alerte, d'action et de spécification.
Les
données recueillies en temps réel par l'analyseur 7000RMS permettent
d'identifier rapidement une détérioration ou une amélioration du contrôle
microbiologique. L'utilisation d'analyseurs 7000RMS sur différents points
d'utilisation ou d'échantillonnage permet d'identifier la source des problèmes
éventuels et de les résoudre rapidement.
